- 知乎 RT—PCR檢測技術(shù)的原理是什么? RT—PCR檢測技術(shù)的原理是什么? 進(jìn)行qPCR,加入DNA聚合酶,buffer,引物,探針。 探針本身是一段DNA序列,能結(jié)合到病毒RNA反轉(zhuǎn)錄后的基因組上。 探針上的熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)靠近,熒光基團(tuán)無法發(fā)出熒光 PCR反應(yīng)一輪,聚合酶合成DNA的時候路過探針會把探針切開,熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)分開,熒光基團(tuán)發(fā)出熒光。 如果是陰性樣品,探針結(jié)合不上去,酶沒辦法切開探針,熒光基團(tuán)不能發(fā)光。 RT-PCR 就是逆轉(zhuǎn)錄 PCR(reverse transcription PCR)或者稱反轉(zhuǎn)錄 PCR,是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的一種廣泛應(yīng)用的變形。